质粒是细菌染色体外独立复制的环状或线状DNA分子,常携带耐药基因、毒力因子、代谢相关基因及重组元件等重要遗传信息,在基因工程、合成生物学、发酵菌种构建及安全性评价等领域具有重要意义。质粒测序通过高通量测序及生物信息学分析,获得质粒的全长序列、拷贝数、结构特征及携带基因信息,为重组质粒/载体构建验证、工程菌株质量控制及质粒携带风险基因排查提供数据支持。
1. 服务内容
服务环节 | 服务内容 |
项目咨询 | 根据质粒大小、拷贝数及结构复杂程度(是否存在重复序列、多质粒共存等)定制测序与分析方案 |
样本检测 | 质粒DNA提取、纯度与浓度检测(Qubit/Nanodrop)、测序文库构建 |
测序策略 | 根据质粒结构复杂程度选择二代测序或二代+三代混合测序,跨越重复区域获得完整环状图谱 |
组装与验证 | 质粒从头组装,获得闭合环状/线状全长序列,并与参考序列或设计序列比对验证一致性 |
注释分析 | 开放阅读框(ORF)预测、功能基因注释、质粒复制子分型、抗性基因及可移动遗传元件分析 |
报告交付 | 质粒图谱、序列比对结果、注释结果及完整原始数据 |
2. 技术特点
全长覆盖:三代测序可跨越重复序列区域,获得无缺口的完整环状质粒图谱;
高精度验证:适用于重组质粒构建后的序列一致性及突变位点验证;
注释全面:涵盖复制子分型、抗性基因、转座子等可移动遗传元件分析,全面评估质粒携带风险。
3. 应用场景
重组质粒/表达载体构建后的序列验证;
工程菌株质粒稳定性及拷贝数监测;
质粒携带耐药基因、毒力基因等风险因子排查;
基因工程产品质粒骨架及插入片段合规性确认。
4. 示例结果展示
质粒环形图示例
5. 服务优势
优势 | 详细说明 |
全长无缺口组装 | 混合测序策略跨越重复序列区域,避免二代测序短读长导致的组装断裂 |
结果快速可用 | 标准化分析流程,可直接输出可用于载体构建报告或申报材料的图谱与序列 |
风险排查全面 | 结合多个公开数据库开展抗性基因、毒力基因及可移动元件分析 |
方案灵活定制 | 可根据质粒数量、复杂程度及交付周期需求灵活调整测序策略 |